Главная Виды Ki 67 5 процентов прогнозы. Иммуногистохимическое исследование. Особенности проведения ИГХ-исследования для выявления маркера

Ki 67 5 процентов прогнозы. Иммуногистохимическое исследование. Особенности проведения ИГХ-исследования для выявления маркера

07.02.2019

ВОПРОС: Здравствуйте доктор! В сентябре 2018 поставили диагноз РМЖ 3 ст, по ИГХ: Эстр. 8 б, Прогест 0 б, her отр. KI 75%. Этот анализ делали в а областной больнице. В декабре отдала стекла на пересмотр в г. Обнинск, Калужская обл. все тоже самое, только показатель KI-10%. Подскажите, пожалуйста, может ли быть такая большая разница KI 67 и кому верить? И если прогестерон 0 считается ли эта опухоль более агрессивной, нежели если бы прогестерон был 7 баллов. Спасибо, с уважением Екатерина.

ОТВЕТ: Здравствуйте! В принципе поменялся только КI 67, но насколько я понял это не повлияло на тактику лечения. Этот показатель определяет назначение химиотерапии, а Вам с 3 стадией ее все равно назначили, поэтому сейчас изменение этого показателя неважно! Что касается прогестерона и эстрогена, важно чтобы один хотя бы показатель был высокий, а у Вас это эстроген и это значит, что рак гормонозависимый и у Вас будет антигормональная эндокринотерапия.

26.03.2018

ВОПРОС: Виталий Александрович, о чем говорит эта цифра - ki 67 20%. Это много или мало? Если опухоль гормонозависимая это люминальный А или люминальный В? В интернете ki 67 для люминального А все разные. Спасибо.

ОТВЕТ: Здравствуйте! Это люминальный тип А, так как КI 67 20%, для люминального Типа В ki 67 больше 20 %. Это не много и означает, что опухоль не так агрессивна.

02.04.2018

ВОПРОС: Виталий Александрович, можно ли сделать прогноз риска метастазирования по ki 67 15%? Спасибо.

ОТВЕТ: Здравствуйте! С данным значением считается, что это низкий риск проявления метастазирования, чем выше данный показатель, тем более высок процент прогрессирования заболевания!

03.04.2018

ВОПРОС: Виталий Александрович, нужна ли химиотерапия при ki 67 20%?

ОТВЕТ: Здравствуйте! Вообще нет, но если есть метастазы в лимфоузлы или отек кожи при данном Ki 67,то химиотерапия все равно нужна!

10.04.2018

ВОПРОС: Виталий Александрович, что такое ki 67? Какая должна быть норма и влияет ли это показатель на прогноз?

ОТВЕТ: Ki-67 - это пролиферативный маркер, который является неотъемлемой частью деления клеток в злокачественной ткани. Высокий процент индекса Ki-67 (> 25%) является независимым прогностическим показателем безрецидивной и общей выживаемости, независимо от клинических и гистопатологических особенностей рака.

11.04.2018

ВОПРОС: Виталий Александрович! Скажите, пожалуйста, если Ki 67 - 7%, HER2/neu-0? T2N1M0, ст.2, 3 ст. зл. Это люминальный В? Может ли быть 3 степень злокачественности при ki 67-7%? Спасибо.

ОТВЕТ: Здравствуйте! Конечно могут быть такие значения ki67 при G3. Если у Вас есть неуверенность и сомнения в этом анализе, то пересмотрите этот результат в независимом онкологическом учреждении, но мне кажется, что в этом нет смысла, так как у Вас есть метастазы в лимфоузлах и Вам все равно рекомендована химиотерапия!

31.05.2018

ВОПРОС: Виталий Александрович, в моей иммуногистохимии есть такой показатель как ki 67. Что означает ki 67 при раке?

ОТВЕТ: Ki-67 - это пролиферативный маркер, который является независимым прогностическим показателем безрецидивной и общей выживаемости, независимо от клинических и гистопатологических особенностей рака. Помимо вклада Ki-67 в прогноз, индекс Ki-67 используется при выборе терапии. Как правило, высокий индекс ki 67 связан с хорошим ответом на химиотерапию, и наоборот, как правило, раковая опухоль с низким ki 67 лучше отвечают на гормонотерапию.

11.06.2018

ВОПРОС: Виталий Александрович, является ли ki 67 25% безусловным показанием для проведения химиотерапии? Спасибо.

ОТВЕТ: Здравствуйте! Да является! И значение этого маркера выше 20% приводит к химиотерапии если нет противопоказаний!

11.06.2018

ВОПРОС: Виталий Александрович, в нашем центре не делают такой анализ как ki67! Стоит ли его сделать самой и на сколько он важен при выборе тактики лечения. Спасибо.

ОТВЕТ: Здравствуйте! Это очень плохо, что его не делают, это очень важный показатель и его надо выполнить, так как от этого маркера зависит дальнейшее лечение! Сделайте его самостоятельно!

15.06.2018

ВОПРОС: Виталий Александрович, здравствуйте! В результате игх написано, что ki 67 не обнаружено! Что это означает? Разве такое бывает? Спасибо.

ОТВЕТ: Здравствуйте! Такого не бывает! Если это РМЖ- то КI 67 должно определяться! Выполните в другом месте! Определить обязательно надо, потому что от этого маркера зависит протокол лечения!

06.07.2018

ВОПРОС: Виталий Александрович мне делали операцию в июле 2015 года- pT1N0M0. индекс Ki67=25%. Her2\neu-2+ . Вы пишите, что при таких показателях нужно делать химиотерапию, но мне не назначали химию, я принимаю только тамоксифен. Что мне делать? Может сделать самостоятельно снова индекс Ki67 и посмотреть насколько эффективно лечение? Химиотерапию наверно уже поздно.

ОТВЕТ: Здравствуйте! Вы получали лечение в 2015 году, и сейчас вам показан приём только Тамоксифена! КI 67 нет смысла пересматривать и уже прошло 3 года, и это хороший результат! У вас Ki 67 25 % и это немного, но дело в том, что у Вас Her 2 neu ++ и надо было делать fish тест! Сейчас это уже неактуально!

07.07.2018

ВОПРОС: Здравствуйте! Подскажите, пожалуйста,ТНРМЖ,стадия T2aN0M0, ki67-18,какой прогноз рецидивов и необходима ли химиотерапия? Спасибо.

ОТВЕТ: Здравствуйте! При триплнегативном раке всегда показана химиотерапия! Доля рецидивов небольшая, но прогрессии
- отдалённое метастазирование имеет место быть, поэтому необходимо наблюдаться у опытного онколога, чтобы этот процесс контролировать!

20.07.2018

ВОПРОС: Здравствуйте. Виталий Александрович. Маркер ki-67 (биопсия шейного л/узла) , заключение "Реакция положительная (++) на 6% клеток опухоли. Насколько срочно необходима химиотерапия? Спасибо.

ОТВЕТ: Здравствуйте! Вы мне практически ничего не сказали, по этой информации я не могу сказать Вам насколько необходимо быстро Вам получать химиотерапию! Какой у Вас рак? Почему лимфоузел? Проконсультировать Вас могу и чем-то помочь только при предоставлении эпикризов из больницы!

04.08.2018

ВОПРОС: Виталий Александрович, что означает Ki 67 в иммуногистохимическом исследовании? Спасибо.

ОТВЕТ: ki 67 это пролиферативный маркер (разрастание ткани путём размножения клеток делением). Высокий процент индекса Ki-67 (> 25%) является независимым прогностическим показателем безрецидивной и общей выживаемости, независимо от клинических и гистопатологических особенностей рака. Помимо вклада Ki-67 в прогноз, индекс Ki-67 используется при выборе терапии. Как правило, высокий индекс ki 67 связан с хорошим ответом на химиотерапию, и наоборот, как правило, раковая опухоль с низким ki 67 лучше отвечают на гормонотерапию.

07.08.2018

ВОПРОС: Добрый вечер, Виталий Александрович! Если ki 67-15%, а grade 3, возраст 38 лет, стадия 1а, гормонозависимый! Нужна ли химиотерапия? Спасибо.

ОТВЕТ: Здравствуйте! В данном случае 38 лет и G3 это низкодифференцированный рак и это плохо! Поэтому не смотря на люминальный тип А, нужна химиотерапия по схеме хотя бы 4 АС и потом тамоксифен 20 мг!

30.08.2018

ВОПРОС: Здравствуйте! Мне 44г, рак молочной железы Т1N0M0, проведена радикальная мастоэктомия по Пейти, er5%,pr0, her2-отрицательный, ki67-до70%, подскажите пожалуйста мои шансы на жизнь?

ОТВЕТ: Здравствуйте! Вы очень молоды и у Вас вся жизнь впереди. Вам надо пройти правильное лечение, и у Вас будут хорошие шансы на долгую ремиссию.

16.09.2018

ВОПРОС: Здравствуйте Виталий Александрович. Скажите пожалуйста, что имеет большее значение для прогноза выживаемости при тнT1N0M0 ki 67- 63% или grade 2 (2+2+2). Понимаю, что ki это деление клеток, а grade это злокачественность. Деление это рост, а злокачественность распространение? Хотя все наверное связанно, чем больше деление, тем в дальнейшем больше распространение? Протоковая карцинома неспецефического типа с тубулярными структурами. Спасибо.

ОТВЕТ: Здравствуйте! Оба показателя важны, но я считаю что является важнее, но G показатель тоже важен, в вашем случае при Т1 это очень важно. Cтепень злокачественности это G, она состоит из баллов, где оценивается ядро клетки, сама клетка и другие показатели, Ki 67 это скорость деления, как она быстро делится. Чем больше Ki 67, тем скорость деления выше и возможность распространения больше, поэтому такую опухоль надо активно лечить химиотерапией.

04.12.2018

ВОПРОС: Виталий Александрович, что означает низкий индекс ki 67? И это хорошо или плохо?

ОТВЕТ: Низкий пролиферативный индекс ki 67 означает, что опухоль менее агрессивная и это, конечно, хорошо! Вы более подробно почитать об этом в справочнике сайта по этой ссылке

07.12.2018

ВОПРОС: Виталий Александрович, и все же при каком проценте пролиферативного маркера Ki-67 молекулярный подтип опухоли становится люминальным Б?

ОТВЕТ: Здравствуйте! Сегодня пока все ещё считается 20 % , но в ближайшее время думаю уже будет цифра 30! В некоторых ведущих центрах уже считают 30%!

ОТВЕТ: Здравствуйте, шансы у Вас хорошие, не надо мыслить негативно! Вам просто надо пройти правильное лечение! КI 67, конечно, высокий, но это не обозначает, что в 82 % появляются метастазы! Это не так! Врачи онкологи все делают для того, чтобы они не появлялись!

01.02.2019

ВОПРОС: Предполагаемый диагноз на узи - дермоидная киста левого яичника больших размеров. Сделана лопароскопия, материал отправлен на KI-67. локализация: зрелая тератома левого яичника. кусочек левого яичника. Вопрос: если это действительно дермоидная киста или зрелая тератома, каков должен быть результат KI-67, каково должно быть дальнейшее лечение и прогноз? Каким образом подтверждается этот предварительный диагноз? Можно ли говорить о раке яичника?

ОТВЕТ: Здравствуйте! Я вам рекомендую обратиться с этим вопросом к онкогинекологу, так как я занимаюсь лечением рака молочной железы.

Исследование ткани с помощью специальных реактивов по принципу антиген-антитело. Ki-67 - маркер пролиферативной активности опухолевой клетки. Он оценивается в процентах и показывает, какой процент опухолевых клеток активно делится. Является фактором прогноза опухолевого заболевания и ответа опухоли на химиотерапевтическое лечение. Чем ниже показатель Ki-67, тем хуже опухоль реагирует на химиотерапевтическое лечение (и наоборот). Низкий уровень экспрессии гладкомышечного актина в строме новообразований и в стенках сосудов характерен для низкодифференцированных раков и опухолей с более высоким метастатическим потенциалом.

Состав исследования:

Гистологическое исследование с определением пролиферативной активности по экспрессии KI-67
Иммуногистохимическое исследование с определением пролиферативной активности по экспрессии KI-67

Синонимы русские

ИГХ, иммуногистохимическое исследование ткани, исследование образца опухолевой ткани, исследование ткани опухоли.

Метод исследования

Гистологический метод.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Локализация б/м: образец ткани (биоптат) опухолевого образования любой локализации.

Общая информация об исследовании

Антиген Ki-67 представляет собой специфический белок, находящийся в ядерном материале опухолевой клетки, и является необходимым для осуществления ее пролиферации, т.е. деления. Обнаружение Ki-67 указывает на опухолевые клетки, которые находятся в фазе деления клеточного цикла. Это позволяет понять, насколько активно и быстро происходит деление опухолевых клеток, а следовательно, и скорость роста новообразования, оценить риск метастазирования, определиться с тактикой терапии и вероятным ответом на нее, прогнозом заболевания.

Считается, что выявление маркера Ki-67 наиболее показательно при раке молочной железы, однако ряд исследований доказывает целесообразность проведения анализа при раке любой локализации, при подозрении на злокачественный процесс, а также при наличии доброкачественных новообразований с оценкой риска их озлокачествления.

Совместное гистологическое и иммуногистохимическое исследование опухолевого материала позволяет сначала получить морфологическое описание процесса, а затем определить его пролиферативную активность – степень и скорость деления клеток. Это дает достаточно точную и объективную оценку степени злокачественности опухоли и прогноз ее дальнейшего развития.

Гистологическое исследование проводится путем изучения срезов опухолевого материала под микроскопом после предварительного окрашивания, которое позволяет выявить и описать отклонения от нормы в структуре ткани, дать характеристику изменениям и сделать вывод о доброкачественности или злокачественности процесса. Далее проводится иммуногистохимическое исследование (ИГХ), направленное на выявление активности роста опухоли. В ходе ИГХ в образец патологической ткани, имеющей в своем составе клетки с антигенами Ki-67, добавляют специально синтезированные меченые антитела. В процессе реакции образуется комплексы "антиген-антитело", доля которых свидетельствует о количестве клеток, находящихся в активной фазе деления. В заключении указывается индекс Ki-67 – индекс пролиферативной активности, выраженный в процентах. При низких значениях индекса опухоль считается менее агрессивной, при высоких – высокоагрессивной. Также по индексу пролиферативной активности можно судить о возможном ответе опухолевого процесса на терапию, оценить эффективность уже проведенного лечения.

Комплексное гистологическое и иммуногистохимическое исследование опухолевого процесса является достаточно сложным и трудоемким анализом. Однако объективность и целесообразность его проведения оправдана точными результатами диагностики, наиболее верным выбором терапии и ответом на нее, более качественным прогнозом течения заболевания.

Для чего используется исследование?

Морфологическое описание опухолевого процесса;
определение пролиферативной активности (скрытого потенциала деления клеток и увеличения в размерах новообразования);
верификация наличия опухолевого процесса и его доброкачественности/злокачественности;
прогноз дальнейшего течения процесса;
подбор наиболее адекватного и объективного метода лечения/выбор терапии;
контроль эффективности проведенной терапии.

Когда назначается исследование?

При наличии ракового процесса любой локализации;
при наличии доброкачественного образования для исключения озлокачествления;
при подборе и контроле терапии.

Что означают результаты?

Результат исследования представляет собой морфологическое описание препарата и подсчет количества клеток, имеющих или не имеющих антиген Ki-67. Высчитывается индекс пролиферативной активности (процент клеток с наличием экспрессии белка Ki-67). Интерпретация полученного результата проводится врачом, назначившим исследование, в зависимости от локализации опухолевого процесса, его типа, проведенного лечения и т.д.

Иммуноцитохимическое исследование соскобов шейки матки с определением белка р16 и Ki 67 (включая жидкостную цитологию – окрашивание по Папаниколау)
Комплексное гистологическое и иммуногистохимическое исследование с определением рецепторного статуса Прогестерона и Эстрогена
Комплексное гистологическое и иммуногистохимическое исследование с определением пролиферативной активности по экспрессии KI-67, а также риска прогрессирования дисплазии и развития рака шейки матки по экспрессии p16INK4a

Кто назначает исследование?

Литература

Sales Gil R, Vagnarelli P. Ki-67: More Hidden behind a "Classic Proliferation Marker". Trends Biochem Sci. 2018 Aug 18.
Du R, Zhang H, Shu W, Chen B, Li Y, Zhang X, Wu X, Wang Z. Correlation between Ki-67 Expression and Hemodynamics of Contrast-Enhanced Ultrasound in Patients with Breast Infiltrative Ductal Carcinoma. Am Surg. 2018 Jun 1;84(6):856-861.

Что означает анализ опухоли на маркер Ki-67 при раке молочной железы, когда он делается? Какаю роль этот тест играет в лечение и прогнозирование заболевания?

Читайте в этой статье

Значение маркера Ki-67

Ki-67 — антиген раковой опухоли, который можно обнаружить в клетке, когда она делится, но в фазе покоя клеточного цикла он не определяется. Эта особенность Ki-67 маркера служит полезным индикатором прогноза поведения злокачественной опухоли. Тест проводится на образце ткани, полученном из опухоли в результате биопсии или оперативным путем.

Для определения этого антигена используются или , или методики оценки геномной активности (Oncotype DX, MammaPrint, Mammostrat). Последние позволяют определить экспрессию гена: активен он или нет в данный момент, для чего синтезируется белок, кодируемый этим геном. В набор тестов входит ген, ответственный за продукцию белка Ki-67.

Роль Ki-67 при раке груди

Тест Ki-67 не является специфичным для рака молочной железы, он применяется и при других злокачественных заболеваниях. Но львиная доля исследований по определению его значения, как маркера опухоли, приходится на этот рак. Исследователи установили, что высокие уровни Ki-67 указывают на агрессивность опухоли и неблагоприятный прогноз.

Вне зависимости от чувствительности рака к гормональному лечению и наличия или отсутствия поражения регионарных лимфатических узлов, при опухолях с высоким уровнем Ki-67 чаще встречается рецидив, и поэтому они имеют плохой прогноз.

Под термином “рецидив” подразумевается возвращение заболевания после проведенного лечения, появление метастазов в отдаленных органах (легкие, печень, кости) или местного рецидива (возобновление роста раковых клеток а регионарных лимфатических узлах, в тканях молочной железы или в области послеоперационного рубца).

Если уровень Ki-67 стал выше в рецидивирующей опухоли, чем в первичной - это признак, что ее необходимо лечить более “агрессивно”, применять комбинацию противораковой терапии.

Ситуации, когда возникает необходимость в этом тесте

Если врач заподозрил, что рак агрессивен, то он может назначит данный анализ, чтобы убедиться, влияет ли уровень Ki-67 на рост опухоли. Другие тесты также проводятся, например, такие как гормональный рецептурный статус опухоли, наличие рецептора HER2 — Neu, определение возможности метастазирования. Данные результатов этих исследований и пролиферативный индекс Ki-67 (оценочный тест) могут повлиять на выбор плана лечения.

Пролиферативный индекс Ki-67 и его польза

Ki-67 является отличным индикатором нахождения клетки в фазе подготовки к делению и самого деления (стадии пролиферации). Индекс Ki-67 — соотношение Ki-67-позитивных клеток, то есть находящихся в стадии пролиферации, ко всем клеткам опухоли. Этот показатель коррелирует с клиническим течением рака. Наиболее исследована эта взаимосвязь при карциноме простаты, головного мозга и груди. Для этих раков неоднократно было доказано его прогностическое значение в ходе проведения крупных клинических исследований. Так, 5-летняя выживаемость рака молочной железы при индексе Ki-67 ниже 10% составляет 95%, а когда выше этого уровня — падает до 80%.

Другая польза индекса Ki-67 при раке молочной железы — возможность предугадать ответ опухоли на запланированное лечение.

Опухоли груди с высоким процентным содержанием делящихся клеток, соответственно, с высоким уровнем индекса Ki-67, хорошо реагируют на химиотерапевтическое лечение.

Так как препараты, которые используют при этом виде терапии, убивают клетки только в фазе их деления. Поэтому чем выше уровень индекса, тем выше вероятность их эффективности.

Зная показатели индекса Ki-67, врач может определить, какое лечение будет “адекватно работать” в каждой конкретной ситуации.

Рекомендуем прочесть статью о том, . Когда встает вопрос о «семейном» или наследственном раке молочной железы и яичников, какие генетические мутации приводят к повышенному риску развития онкологической патологии, а также почему известная актриса не стала рисковать и удалила у себя органы, которые возможно будут поражены, вы сможете подробнее прочесть в этой статье.

Спорные вопросы

Как было указанно выше, исследования показали, что опухоли с более высоким уровнем Ki-67 имеют плохой прогноз, но хорошо реагируют на химиотерапию. Есть ли такая корреляция у женщин с положительными лимфатическими узлами (на момент постановки первоначального диагноза поражены регионарные лимфоузлы) ― четкого ответа пока нет. Другой нерешенный спор по поводу значения этого теста ― его польза при определении необходимости адъювантной химиотерапии.

Как “справиться” с плохим результатом теста

Зная, что опухолевый маркер Ki-67 ― показатель прогноза, у женщины с высокими уровнями этого теста может возникнуть чувство тревоги. Тем не менее, осведомленность о возможностях современного лечения даже при самых поздних стадиях рака молочной железы позволяет принять правильное решение. С каждым годом эти методики улучшаются.

Общение в семье, контакты в сообществе женщин с диагнозом рака молочной железы или на интернет-форумах, просвещенных данному заболеванию, помогут справиться с этой тревогой. Это не только способно поддержать женщину, но и позволит ей получить полезную информацию, необходимую для своевременного решения проблемы. Существует множество причин не терять надежду и шанс на исцеление.

ID: 2015-06-1276-A-5298

Оригинальная статья (свободная структура)

Маслякова Г.Н., Понукалин А.Н., Цмокалюк Е.Н.

ГБОУ ВПО Саратовский ГМУ им. В.И. Разумовского Минздрава России

Резюме

Ключевые слова

Рак мочевого пузыря, онкомаркер

Статья

Введение. Рак мочевого пузыря (РМП) является самым частым онкологическим заболеванием мочевыделительной системы. В 2011 году в Российской Федерации диагностировано 13784 случая РМП, при этом прирост этого заболевания за последние 10 лет составил 15,26%. Летальность от РМП на первом году с момента установления диагноза составляет 19,5%. , поэтому диагностика и лечение больных раком мочевого пузыря (РМП) является одной из актуальных проблем урологии.

По клиническому течению выделяют мышечнонеинвазивный (Tis, Ta, T1), мышечноинвазивный (T2-T4) и метастатический РМП. Поверхностные и мышечноинвазивные опухоли мочевого пузыря в 90-95% представлены уротелиальной карциномой, но отличаются по целому ряду молекулярно-генетических, морфологических и иммуно-гистохимических признаков.

Мышечноинвазивный рак мочевого пузыря (МИРМП) - потенциально смертельное заболевание, так как без лечения больные погибают в течение 24 месяцев. У 50% больных МИРМП, оперированных радикально, развивается рецидив, что связано с морфологической стадией развития первичной опухоли и состоянием регионарных лимфатических узлов. Наиболее распространенная локализация метастазов уротелиального рака - регионарные лимфатические узлы (78%), печень (38%), легкие(36%), кости (27%), надпочечники (21%) и кишечник (13%), реже (1%- 8%) развиваются метастазы в сердце, головном мозге, почках, селезенке, поджелудочной железе, мозговых оболочках, матке, яичниках, простате и яичках. Следует отметить, что в течение первого года развития заболевания группу МИРМП пополнят еще 15-30% больных с поверхностным РМП, у которых возникает рецидив опухоли с мышечной инвазией .

В России в 2011 году среди зарегистрированных впервые выявленных больных в 45,8% случаев диагностируются I - II, в 37,6% -III и в 16,6% -IV стадии РМП. В большинстве случаев органосохраняющее лечение удается провести только в Т1-Т2 стадиях заболевания. В Т3-Т4 стадиях выполняется цистэктомия или паллиативное лечение. Правильно выбранная тактика лечения является принципиальным моментом для дальнейшей жизни больного. Так, после удаления мочевого пузыря качество жизни больных значительно снижается, и им устанавливается 1 - 2 группы инвалидности. В то же время неоправданно длительное консервативное лечение может привести к гибели больных .

Сегодня изучено влияние на течение РМП более 30 прогностических факторов и установлено, что независимыми факторами, влияющими на общую выживаемость, являются только стадия опухоли и поражение метастазами регионарных лимфатических узлов (EAU-2009).

Результаты лечения РМП непосредственно связаны со стадией заболевания. Так, пятилетняя выживаемость в Т1 стадии составляет 90-80%, в Т2 - 70-63%, в Т3 - 53-32% и в Т4 - 28-5% . Вместе с тем частота ошибок в предоперационном периоде при определении стадии рака мочевого пузыря достигает 73% . Даже морфологическое исследование может давать ошибку в определении глубины инвазии опухоли в 20-50% .

Дооперационная диагностика метастазов в регионарных лимфатических узлах является неудовлетворительной. Компьютерная томография позволяет выявить только 35-40% метастатически пораженных лимфатических узлов, а тонкоигольная аспирационная биопсия лишь незначительно улучшает диагностику, так как ее чувствительность не превышает 60%, а выполняется эта процедура лишь при увеличенных лимфоузлах .

Поражение регионарных лимфатических узлов при инвазивном раке мочевого пузыря является крайне неблагоприятным прогностическим фактором. Показано, что после цистэктомии 50% больных умирают в течение 12 месяцев с регионарными метастазами в лимфатические узлы и 87% в течение 24 месяцев; пятилетняя выживаемость составляет менее 7%. Расширенная лимфодиссекция и системная химиотерапия достоверно улучшает выживаемость этих больных, поэтому дооперационная диагностика метастазирования в лимфоузлы может существенно повлиять на выбор тактики лечения в этой группе больных .

Кроме глубины инвазии опухоли и метастатического поражения лимфатических узлов, на прогноз МИРМП влияет степень злокачественности переходно-клеточной карциномы. Однако при мышечно-инвазивном РМП, как правило, не встречаются уротелиальные опухоли с низким злокачественным потенциалом или высокодифференцированные (G1) карциномы. Во всех случаях определяется уретериальный рак высокой степени злокачественности (G2 или G3 по классификации ВОЗ, 1973). В связи с этим дальнейшая дифференциация МИРМП не несет никакой прогностической информации .

Ошибки в стадировании заболевания на основании клинических и рутинных гистологических исследований стимулировали интерес к иммуногистохимии, позволяющей прогнозировать характер течения болезни у каждого конкретного больного на основании изучения молекулярных маркеров. Наиболее изученными генами, вовлеченными в регуляцию клеточного цикла, являются гены-супрессоры опухоли p53 и p21. Ген р53 регулирует клеточный цикл и апоптоз, контролирует целостность генома. Активируясь в ответ на самые разные неблагоприятные воздействия, p53 осуществляет на транскрипционном уровне одновременно и активацию гена bax, и супрессию гена bcl-2, отвечающих за апоптоз. При развитии неоплазий, в том числе и переходно-клеточных карцином, часто отмечаются соматические мутации гена р53. Мутации Р53 при карциномах уротелия выявляют в 29-53% случаях, однако мнения авторов о прогностической ценности этого показателя противоречивы .

Пролиферативная активность клетки может быть оценена при помощи различных методик. К ним относятся подсчет количества митозов Ki-67-позитивных клеток, выявление антигена ядра пролиферирующей клетки (PCNA), Р63. Антитела к Ki-67 применяют для оценки пролиферативной активности многих новообразований. Его прогностическая ценность доказана при поверхностном раке мочевого пузыря. Исследование Ki-67 позволяет прогнозировать темп роста опухоли и реакцию опухоли на проводимую химиотерапию. Ki-67 так же является независимым прогностическим фактором в отношении рецидивирования у больных с поверхностными формами РМП, имеющих высокий риск [6]. Сведения о влиянии Ki-67 на прогноз у больных с МИРМП противоречивые и изучены недостаточно.

Цель исследования : провести сравнительную оценку эффективности различных иммуногистохимических маркеров в определении стадии и прогнозе мышечно-инвазивного РМП.

Материалом для исследования послужил операционный материал 80 пациентов с новообразованиями мочевого пузыря, проходивших лечение в НИИ клинической и фундаментальной уронефрологии СГМУ и группе контроля (таб.1).

Операционный и биопсийный материалы были фиксированы в 10% -ном растворе нейтрального формалина и залиты в парафин. Срезы толщиной 5-7 мкм, окрашенные гематоксилином и эозином, были подвергнуты обзорному морфологическому анализу, при котором стадию рака определяли в соответствии с классификацией TNM, а степень дифференцировки опухолевых клеток оценивали в соответствии с рекомендациями ВОЗ, 2004. Изучение препаратов было проведено с применением бинокулярного микроскопа «Micros MC100» при 600-кратном увеличении (объектив - 40х, бинокулярная насадка - 1,5х, окуляры - 10х). Материал был разделен по группам с учетом клинической стадии рака. Всего было исследовано 94 образца.

Исследовано 3120 срезов, окрашенных гематоксилином и эозином, и на 12 различных маркеров.

Для иммуногистохимического исследования были использованы 12 коммерческих моноклональных антител, разделенных на группы по функциональной значимости:

маркеры пролиферативной активности -Ki67, PCNA, p63,
супрессор опухолевого роста - р53,
маркер апоптоза Bcl2,
рецептор эпидермального фактора роста - EGFR,
цитокератиновый профиль - ЦК7, ЦК8, ЦК10/13, ЦК17, ЦК18, ЦК19.

Методика иммуногистохимического окрашивания

Иммуногистохимические реакции ставили на серийных парафиновых срезах (5мкм), используя стрептавидин-биотиновый метод. В качестве детекционной системы применяли систему LSAB2 System, HRP (K0675), Dako, в качестве хромогена - диаминобензидин (Dako).

Интенсивность реакций, локализованных в цитоплазме (цитокератины 7,8,13, 17,18,19) и на мембранах клеток (EGFR) оценивали полуколичественным способом по балльной шкале от 0 до 3 с помощью светового бинокулярного микроскопа «MicrosMC100», учитывая выраженность реакции и ее локализацию: 0 - отсутствие реакции, 1 - слабая реакция, 2 - умеренная реакция, 3 - сильная реакция.

Результаты реакций с антигенами, имеющими ядерную локализацию (PCNA, Ki67, p53, p63, bcl2), оценивали, подсчитывая количество окрашенных ядер на 100 ядер в 3 полях зрения, выражая полученные результаты в процентах.

Результаты реакций с антигенами, имеющими ядерную локализацию (PCNA, Ki67, p53, p63, bcl2) оценивали по системе подсчета histochemicalscore . Система подсчета включает в себя интенсивность иммуногистохимической окраски по 3-х бальной шкале и долю (%) окрашенных клеток и представляет собой сумму произведений процентов, отражающих долю клеток с различной интенсивностью окраски на балл, соответствующий интенсивности реакции. Интенсивность окраски 0 - нет окрашивания, 1 - слабое окрашивание, 2- умеренное окрашивание, 3 - сильное окрашивание.

Формула подсчета следующая: histochemicalscore = ∑ P (i) х i,

где i - интенсивнось окрашивания, выраженная в баллах от 0 до 3. P (i) - процент клеток, окрашенных с разной интенсивностью. Максимальное значение гистосчета должно соответствовать 300.

Статистический анализ проводили с использованием пакета программ статистической обработки результатов SSPS 13.0 forWindows.

Результаты. При иммуногистохимическом исследовании 12 онкомаркеров было установлено, что для установления стадии рака мочевого пузыря и прогноза заболевания рационально использовать только 4: маркеры пролиферативной активности Ki67, p63, супрессор опухолевого роста - р53 и рецептор эпидермального фактора роста — EGFR. В таблице 2 дана сравнительная оценка эффективности иммуногистохимических маркеров для определения стадии РМП.

Из таблицы 2 видно, что все эти маркеры не дают положительной экспрессии в группе сравнения, что может использоваться при дифференциальной диагностике

РМП и других неоплазий. Кроме этого, процент экспрессирующих клеток указанных маркеров позволяет судить о степени инвазии РМП, что является важным моментов для определения стадии заболевания, следовательно, и прогноза. Именно поэтому Ki 67 весьма перспективно можно использовать для дифференциальной диагностики между Т2 и Т3-Т4, что является весьма важным, так как выход опухоли за пределы органа свидетельствует о неблагоприятном прогнозе. Он может быть использован, как прогностический, способный повлиять на выбор тактики лечения у больных МИРМП.

При анализе показателей экспрессии маркеров в каждой из стадий РМП, представленной в таблице 3, установлено, что маркер Ki 67 показал 100% -ную экспрессию у пациентов со стадией РМП Т3 и Т4, в то время как в стадии Т2 его экспрессия составила только 56,5%, что является достоверным различием.

С целью изучения прогностической значимости были изучены отдаленные результаты лечения 27 больных РМП, чью судьбу удалось проследить на протяжении 5 лет. У всех пациентов при иммуногистохимическом исследовании ткани опухоли Ki 67 дал положительную экспрессию.

Из 27 больных РМП 11 пациентам выполнено органосохраняющее, комплексное лечение, включающее в себя трансуретральную электрорезекцию стенки мочевого пузыря вместе с опухолью и системную полихимиотерапию по схеме M-VAC (метотрексат, винбластин, доксорубицин, цисплатин). У 13 больных произведена цистэктомия, а 6 пациентов признаны иноперабельными; им осуществляли только симтоматическую терапию.

Из таблицы 4 видно, что из 27 больных РМП - 16(59,2%) умерло. Из них 10 (62,5%) - в первый год. Из 10 умерших в первый год 9 (90%) пациентов имели экспрессию Ki 67 ≥ 30%. У всех 9 больных стадия заболевания была Тзb-T4N0-1M0-1.

В то же время из 11 больных РМП, которые прожили более 5 лет, в 70% экспрессия Ki 67 составила < 30%. Стадия заболевания у выживших больных, была Т1N0M0- 4; Т2N0M0- 6; Т3N0M0-1.

Таким образом, независимо от способа лечения с достоверностью в 81,2% Ki67 может предсказать неблагоприятный исход заболевания в течение 24 месяцев.

При мышечноинвазивном РМП Т2N0M0-Т3-4N0-1M0-1 (22 больных) в первые 24 месяца умерли 14(62%). Экспрессия Ki 67у этих больных колебалась от 30 до 80%.

При органосохраняющем лечении больных в стадии Т1-Т2 (11 пациентов) в первые два года умерло 5(45,4%) больных, у которых экспрессия Ki 67 составляла ≥30%.После цистэктомии (n=13) умерли 8(61,5%), у 7(87,5%) из них Kj 67 был >30%. Из 11, проживших 5лет и более лет только в двух случаях Kj 67 было >30% (34 и 44), у остальных - 9 (82%) Ki67 был менее 30%.

Заключение. Проведенная сравнительная оценка эффективности различных иммуногистохимических маркеров в стадировании и прогнозе мышечно-инвазивного РМП показала, что наиболее эффективным маркером является маркер пролиферативной активности - Ki 67. Установлено, что при экспрессии

Ki 67 >30%, независимо от способа лечения, с достоверностью в 81, 2% возможны рецидив заболевания и летальный исход в течение 24 месяцев. В то же время при значениях Ki67 < 30% пятилетняя выживаемость составляет 70%.

Таким образом, маркер пролиферативной активности - Ki 67 может быть вспомогательным прогностическим фактором при выборе объема оперативного лечения (органосохраняющая операция или цистэктомия).

Литература

Таблицы

Таблица 1.Характеристика исследуемых больных

Показатель	Количество больных

Общее число РМП
Средний возраст, годы


Стадия заболевания
Т0N0M0 -группа сравнения